半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)試劑盒微量法說(shuō)明書
微量法 100管/48樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)試劑盒微量法
貨號(hào):LZ-S01115
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法:微量法
產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
發(fā)貨地:上海
測(cè)定意義:
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱氨酸亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測(cè)定CSL活性對(duì)于研究食品安全具有重要意義。
測(cè)定原理:
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與2,4-二硝基苯肼反應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存,臨用前加入 2mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保
存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加入 10mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃
保存;
試劑三:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 6mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
NAD+和 NADH 的提取:
1 血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。NADH 的提?。喊凑昭澹{)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2 組織中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g組織,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
NADH 的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g
組織,加入 1mL 堿性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。NADH 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
生化檢測(cè)試劑盒操作步驟:
一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?:確保操作臺(tái)面干凈、整潔,這是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的步。
?二、?仔細(xì)閱讀說(shuō)明書?:這是使用試劑盒的基礎(chǔ),說(shuō)明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說(shuō)明書的指導(dǎo),正確采集樣本。不同類型的檢測(cè)可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產(chǎn)生泡沫,以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
?五、?等待反應(yīng)?:混合后,耐心等待試劑盒的反應(yīng),這個(gè)時(shí)間可以用來(lái)進(jìn)行其他活動(dòng),但不要著急,因?yàn)楹玫慕Y(jié)果值得等待。
六、結(jié)果判讀?:時(shí)間到后,仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會(huì)有明確的指示,告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來(lái)判斷結(jié)果。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽 0.5mgCaspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)
CXCL9 Protein Human 重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL7R Protein Rat 重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RSPO2重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠絲酸轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)ELISA試劑盒 ,英文名: SPINK3 ELISA Kit
小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 96T/48T
人谷酸[NMDA]受體亞基ε-2(-2)試劑盒 Human -2 ELISA Kit
RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ATP酶法冰凍切片人體肌肉組織分型染色試劑盒20次
MouseHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒小鼠組織蛋白去乙?;?HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽 0.5mgCaspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)
RSPO2重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標(biāo)簽) Protein
CXCL9 Protein Human 重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
IL7R Protein Rat 重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)試劑盒微量法小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 ,英文名: Cr ELISA Kit
大鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit 96T/48T
人胞漿型0脂酶A2-α(cPLA2-α)試劑盒 Human cytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit
RatVitaminD2,VD2ELISAKit大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
P11-12顯色(SULFOORANGE)指示溶液50毫升
PorcineIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。