戊糖片球菌(Streptococcus mutans)是一種革蘭氏陽(yáng)性球形細(xì)菌,常常存在于口腔中,是口腔微生物群落中的重要成員之一。它是導(dǎo)致齲齒的主要致病菌之一,可以利用食物中的糖分產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,破壞牙齒表面的牙釉質(zhì),終導(dǎo)致齲齒的形成。同時(shí),戊糖片球菌還可以通過(guò)口腔中的細(xì)菌群落的微生態(tài)平衡失調(diào),導(dǎo)致口腔疾病的發(fā)生。因此,對(duì)于戊糖片球菌的控制和管理,對(duì)于口腔健康具有重要的意義。
低溫存法:
① 簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們?cè)谏畹膭?dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
益生芽孢桿菌:是一類對(duì)機(jī)體具有益生特性的丁酸梭菌:又名酪酸梭菌,是從健康人和動(dòng)物腸道中分離出的一種厭氧的革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌。目前研究發(fā)現(xiàn)丁酸梭菌具有維持腸道菌群平衡、增強(qiáng)機(jī)體功能、生成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、防治腸炎等良好的益生特性、好氧或兼性厭氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細(xì)菌,為革蘭氏染色陽(yáng)性菌
益生菌可合成消化酶,它們與動(dòng)物體合成的消化酶一起,參與腸道中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化 [3] ,刺激動(dòng)物體分泌消化酶,降低小腸隱窩深度,增加絨毛高度,增加小腸表面積,促進(jìn)腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收
益生菌的自身結(jié)構(gòu)如肽聚糖、脂磷壁酸等成分可作為抗原直接發(fā)揮激活作用,或者通過(guò)自分泌激活劑,刺激宿主系統(tǒng),從而提高動(dòng)物的力,增強(qiáng)機(jī)體固有細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的活性,激活樹(shù)突狀細(xì)胞,刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞因子,并刺激 B 細(xì)胞分泌抗體 [5] ,益生菌可刺激腸道產(chǎn)生分泌性球蛋白 A(SIgA),保護(hù)機(jī)體健康。