猴唾液酸(SA)ELISA試劑盒特異性強(qiáng)，重復(fù)性好

猴唾液酸(SA)ELISA試劑盒特強(qiáng)，重復(fù)性好

實驗原理：試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠4壬烯醛(4-HNE)捕獲的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、品、HRP標(biāo)記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠4壬烯醛(4-HNE)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒組成：

ELISA （Enzyme-Linkedimmunosorbent assay）的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。這一的基本原理是：①使抗原或結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或，這種酶標(biāo)抗原或既保留其活性，又保留酶的活力。在測定時，把待測樣本（測定其中的或抗原）和酶標(biāo)抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與其他分開結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān)，所以可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高，所以可地放大反應(yīng)效果，從而使測定達(dá)到很高的度。

自備材料

1）蒸餾水。

2）加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3）振蕩器及磁力攪拌器等。



猴唾液酸(SA)ELISA試劑盒特強(qiáng)，重復(fù)性好

樣品收集、處理及保存

1）-----操作中避免任何細(xì)胞。使用不含熱原和內(nèi)的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2）-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒性能

1. 靈敏度的檢測濃度小于1號品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié)果判斷與分析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的待測品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的待測含量可根據(jù)其OD值由曲線換算出相應(yīng)的濃度。